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    生物:第二部分《实验六 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测》课件13(浙科版选修1)
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    高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题1 果酒和果醋的制作课文内容课件ppt

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    这是一份高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题1 果酒和果醋的制作课文内容课件ppt,共24页。PPT课件主要包含了三个问题,①提取法,③发酵法常用方法,②化学合成法,吸附法,固定化酶技术的优点,包埋法,交联法,共价偶联法,遇碘显蓝色等内容,欢迎下载使用。

      活性成分就是洗涤剂中起主要作用的成分。洗涤活性成分是一类被称作表面活性剂的物质,它们含有疏水基团和亲水基团,在洗涤中起乳化和通透作用。它们可以减弱污渍与衣物间的附着力,在洗涤水流以及手搓或洗衣机的搅动等机械力的作用下,使污渍脱离衣物,从而达到洗净衣物的目的。
    实验六α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
    实验目的:1. 掌握α-淀粉酶的固定化2. 检测固定化α-淀粉酶的效果
    基础知识:酶的固定化技术
    本节课重点基础知识:酶的固定化技术
    1.产生背景:2.概念:3.常用方法:
    1、背景——酶制剂的生产
    定义:采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来
    要有充足的原材料,广泛应用受到限制
    定义: 通过微生物发酵获得所需要的酶。
    易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。
    成本高、已知分子结构的酶
    酶在应用过程中存在的问题
    ①天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机 溶剂等条件非常敏感,容易失活
    ②溶液中酶很难回收,不能再次利用,提 高了生产成本
    ③反应后,酶会混在产物中,影响产品质 量,难以在工业生产中广泛应用
    在生产实践中如何克服上述缺点?
    固定化酶: 将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
    直接使用酶和固定化酶的优缺点
    2.固定化酶技术生产高果糖浆的图示:
    把酶固定在反应柱上有何好处?
    反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高果糖的产量和质量。
    固定化酶:将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
    (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离;(2)固定在载体上的酶可以被反复利用。
    3.酶固定化的常用方法:
    将酶吸附到固体吸附剂表面的方法,
    对蛋白质有高度的吸附能力、又不引起酶变性且能保持一定酶活性。如:活性碳、多孔玻璃、石英砂、有机硅等
    举例:α-淀粉酶的固定化
    利用蛋白质的两性性质,使其带有电荷的基团与离子交换剂形成离子键,而被交换结合在交换剂上
    将酶包裹在多孔的载体中,包埋成格子型或包埋成微胶囊型
    酶的某些基团与载体共价结合。稳定性好,酶蛋白不易脱落,但较难获得活性很高的固相酶。
    利用双官能团或多官能团试剂与酶之间发生分子交联来把酶固定化的方法。
    实验设备和材料:38页—39页
    5mml/L KI-I2溶液称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加蒸馏水100ml。
    a-淀粉酶的固定化在烧杯中将5mg a-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中。再加入 5g石英砂,不时搅拌,30分钟后装入反应柱中。用10倍体积的蒸馏水洗涤此反应柱以除去未吸附的游离淀粉酶,流速控制为1ml/min。
    可溶性淀粉溶液取50mg可溶性淀粉溶于100ml热水中,搅拌均匀。
    1.α-淀粉酶的固定化
    5mgα-淀粉酶+4ml蒸馏水+5g石英砂,搅拌30min
    装入下端接有气门心并用夹子封住的注射器中
    用10倍柱体积的蒸馏水洗涤除去未吸附的游离淀粉酶
    注意:这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶 其作用的最适温度为50-75℃;最适PH为5.5-7.5
    用吸附法将α-淀粉酶固定在石英砂上。一定浓度的淀粉流经固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,流出物用KI-I2溶液测试呈红色,表明水解产物糊精生成。
    2、淀粉水解作用的检测
    50mg淀粉溶于100ml热水中,搅拌均匀
    使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱,在流出5ml淀粉后接收0.5ml流出液。
    加入1-2滴KI-I2溶液,观察颜色变化。用水稀释1倍后再观察颜色。
    10倍柱体积蒸馏水洗涤此柱,放置4℃冰箱保存,几天后取出重复实验。
    1、α-淀粉酶的固定化
    a.控制滴灌流速。0.3mL/min的流速,我们就可以控制每分钟滴管流出量为每分钟6滴(6=0.3mL/ 50uL)。这样做的目的是控制流速让淀粉和淀粉酶充分接触,反应。
    b.显色。在流出5mL后接取0.5mL过滤液,然后向试管中加入1-2滴KI-I2 溶液。切记,KI-I2 溶液不要加入太多,以免碘液颜色覆盖糊精淀粉反应后的颜色。
    1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?
    2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?
    可在试管中加入1ml可溶性淀粉,再加几滴淀粉酶柱流出液,保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色,则流出液中没有淀粉酶了。
    可以在高温下使淀粉水解快,而且酶不会因高温上而失活,所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。
    1. 某一实验小组的同学,欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验,实验材料及用具齐全。(1)酵母细胞的固定常用的方法是 。(2)该实验小组用如图所示的装置来进行葡萄糖发酵①图中a 为固定化酵母;b是反应柱。②从上端漏斗中加入反应液的浓度不能过高的原因是:。③为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可反复运用,实验过程一定要在 条件下进行。④装置的长导管起到什么作用?。
    浓度过高酵母细胞因失水过多而死亡。
    释放CO2防止空气进入。
    2、研究认为,用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂,可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药,与用微生物降解相比,其作用不需要适宜的( )A、温度 B、PHC、水分 D、营养
    3、目前,日用化工厂大量生产的酶制剂,其中的酶大都来自A、化学合成 B、动物体内 C、植物体内 D、微生物体内
    3.酶的固定方法不包括( )。A. 将酶吸附在固体表面上 B.将酶相互连接起来C.将酶包埋在细微网格里 D.将酶制成固体酶制剂,如加酶洗衣粉中的酶
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