【期中复习】2023-2024学年（人教版2019选择性必修3）高二下册生物期中易错题训练.zip

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1．下列关于泡菜的制作和亚硝酸盐含量测定的叙述， 正确的是（ ）
A．将蔬菜用开水和白酒浸泡 1min 以加快发酵速度
B．在发酵过程中出现白膜可能是由于酵母菌大量增殖而引起的
C．测定亚硝酸盐含量用波长为 550nm 的光是因为亚硝酸盐对该波长的光有最大的吸收率
D．若制作标准曲线时用的比色杯的光程比待测样品的比色杯光程大，则计算出的待测样品中亚硝酸盐的含量偏低
2．从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ）
A．可使用液体培养基进行富集培养
B．为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌
C．获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次
D．利用图b计算出样品中菌体浓度为5．85×108个/ml，则接种稀释液的稀释倍数为107倍
3．在某地的农业生产中，研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，且长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂是一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。下列相关叙述正确的是（ ）
A．只有长期使用该除草剂的土壤中才含有能降解该除草剂的细菌
B．筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源
C．图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数
D．经过一段时间的培养，培养皿中应该只存在有透明圈的菌落
4．近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株——拟杆菌新菌株并进一步研究了其生物学特性。有关说法错误的是（ ）
A．培养基接入沉积物样品后，需要在低温厌氧培养一段时间才能获得含拟杆菌的培养物
B．在以纤维素为唯一碳源时可以得到纯种培养的拟杆菌新菌株
C．将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存
D．藻类细胞解体后难降解的多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部，推测拟杆菌新菌株为异养生物，作为分解者起作用
5．镇江陈醋具有“色、香、酸、醇、浓”之特色，其主要工艺流程如下图。相关叙述正确的是（ ）
A．作为工业生产，镇江陈醋的酿制过程需要做到严格无菌
B．“淋饭”有助于提高发酵原料的透气性，有助于霉菌的糖化等过程
C．接种醋酸菌后的固态发酵需要“翻缸”，主要目的是抑制杂菌
D．后发酵时间越长，醋体中风味物质的不断堆积导致醋品更佳
6．培养基是指供给微生物、植物或动物细胞（或组织）生长繁殖的，由不同物质组合配制而成的营养基质。针对下表中的三组培养基，下列叙述错误的是（ ）
A．a组培养基可用于醋化醋杆菌的扩大培养，该培养过程需用到磁力搅拌器和摇床
B．b组培养基可用于分离含脲酶的微生物，该实验中需用全营养LB固体培养基作对照
C．c组培养基可用于诱导植物愈伤组织再分化，添加的植物生长调节剂需事先过滤灭菌
D．上述培养基不仅要为相应的细胞提供营养物质还要为其生存和繁殖提供适宜的环境
7．堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，有控制地促进固体废物中可降解有机物转化为稳定的腐殖质的生物化学过程。下图为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线。若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，下列相关叙述错误的是（ ）
A．微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高
B．与a点相比b点时微生物的数量较多，与c点相比b点时微生物种类较多
C．c点时，可对堆肥取样并用角蛋白氮源培养基对微生物群进行培养和筛选
D．若采用平板划线法分离微生物，需对取样获得的原液进行适当稀释后再划线
8．影印平板法是将长有若干个菌落的平板作为母平板，将其倒置于包有一层灭菌丝绒布的印章上，使印章均匀地沾满来自母平板的菌落，然后通过此印章将母平板上的菌落“忠实”地接种到不同选择培养基上的培养方法。通过比较影印平板与母平板上菌落的生长情况，可以筛选出所需要的菌种。已知地衣芽孢杆菌能产生耐高温的α-淀粉酶，野生型地衣芽孢杆菌对头孢菌素和庆大霉素均有抗性，利用诱变技术获得的某突变株对头孢菌素和庆大霉素同时具有敏感性，但其同时也成为了能合成耐高温α-淀粉酶的高产菌株。请利用影印平板法筛选出此高产菌株。关于实验思路的叙述错误的是（ ）
A．将待测菌悬液用稀释涂布平板法接种到完全培养基平板上培养，待菌落稳定后作为母平板
B．将母平板上的菌落用印章影印接种到同时含有头孢菌素和庆大霉素的选择培养基平板（影印平板）上
C．培养到长出稳定菌落，比较不同平板上相同位置菌落的生长情况
D．在两种平板的相同位置上，在影印平板上不能生长而在母平板上能生长的菌落中含有高产菌落
9．野生型大肠杆菌能够在基本培养基中生长，突变菌株A和突变菌株B由于不能自己合成某些营养素，而不能在基本培养基上生长。科学工作者利用菌株A和菌株B进行了如下两个实验。实验一：将菌株A和菌株B混合后，涂布于基本培养基上，结果如图1；实验二：将菌株A和菌株B分别置于U型管的两端，中间由过滤器隔开。加压力或吸力后，培养液可以自由流通，但细菌细胞不能通过。经几小时培养后，将菌液A、B分别涂布于基本培养基上，结果如图2。下列推测错误的是（ ）
A．菌株A和B的代谢产物不能改变彼此的遗传特性
B．混合培养的菌株不一定都能在基本培养基上生长
C．不同菌株间接触后才可能交换遗传物质
D．菌株A和菌株B含有相同的突变基因
10．细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理
B．对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用血球计数板计数
C．由甲、乙，丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性
D．野生型细菌X在与tcel—tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势
11．普通六倍体小麦基因组庞大，研究相对困难。拟南芥基因组测序已完成，遗传背景相对清晰。用紫外线分别照射普通小麦愈伤组织的原生质体30s、1min、2min，再与拟南芥原生质体进行融合，可将小麦染色体小片段插入拟南芥基因组。下列叙述错误的是（ ）
A．紫外线照射可随机破坏染色体结构
B．可利用灭活病毒促进两种原生质体融合
C．需设置单独培养的未融合原生质体作为对照组
D．借助拟南芥的遗传背景对小麦基因组进行研究
12．某杂种植株的获取过程如图所示，下列有关分析正确的是（ ）
A．叶片经消毒后需用流水多次冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害作用
B．图示①过程采用酶解法获取原生质体时，可用聚乙二醇调节渗透压
C．图示②过程通过抽真空处理使酶溶液渗入细胞间隙，提高酶解效率
D．经④过程获得的杂种细胞经鉴定和筛选后进行植物组培，即可获得目标杂种植株
13．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A．图1培育杂种植株所用的技术体现了植物细胞全能性和细胞膜流动性原理
B．图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行
C．图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜
D．病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株
14．下面图1为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。下列相关叙述错误的是
A．图1子代Ⅰ与原种保持遗传稳定性，子代Ⅱ和子代Ⅲ选育原理相同
B．图1子代Ⅲ选育显性性状需自交多代，子代Ⅴ可能发生基因突变和染色体变异
C．图2中①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与
D．图2中⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质
15．下图是遗传育种的一些途径，下列有关分析错误的是（ ）
A．H→I、J→K都必须用到与G过程相同的技术操作
B．由F1→F2的育种原理是基因重组
C．图中的遗传育种途径，A→B所表示的方法具有典型的不定向性
D．若要在较短时间内获得图示新品种小麦，可选图中E→F→G的育种方法
16．CD20抗原是一种B细胞分化抗原，可位于前B细胞和成熟B细胞上。CD20抗原基因在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达，而在造血干细胞、浆细胞和其他正常组织细胞中不表达。利妥昔单抗是针对CD20抗原的一种单克隆抗体，其与肿瘤细胞上的CD20抗原特异性结合后可以诱导肿瘤细胞凋亡。分析以上材料，下列叙述错误的是（ ）
A．利妥昔单抗能特异性识别CD20抗原并发挥作用
B．利妥昔单抗为肿瘤细胞提供了诱导细胞凋亡的信息
C．造血干细胞分化为成熟B细胞的过程中，CD20抗原基因进行表达
D．当受到病原体和相应辅助T细胞表面发生变化的特定分子刺激时B细胞即可活化
17．治疗最凶险乳腺癌“HER2+”的抗体-药物偶联物(T-DM1)被纳入2023年医保目录名单。T-DM1由曲妥珠单抗、细胞毒性药物DM1偶联形成。T-DM1作用机制如下图，下列有关叙述错误的是（ ）
A．曲妥珠单抗的作用是将DM1准确带至乳腺癌细胞
B．T-DM1被乳腺癌细胞吞噬后释放DM1抑制微管聚合进而导致细胞凋亡
C．曲妥珠单抗制备中可选择DM1作为抗原刺激小鼠产生免疫应答
D．利用同位素或荧光标记的曲妥珠单抗可定位诊断HER2+
18．我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），过程如下图所示。该细胞可分化成各种杂种体细胞，为研究不同物种性状差异的分子机制提供了模型。相关叙述错误的是（ ）
A．单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵母细胞经体外诱导培养获得
B．体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分
C．该项技术突破生殖隔离获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞
D．AdESCs的染色体组数与大鼠和小鼠体细胞融合的杂种细胞相同
19．CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6—5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体，并进一步探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示，下列分析正确的是（ ）
A．可用灭活病毒诱导②过程两种细胞融合，该方法也适用于植物体细胞的杂交
B．③过程可利用CD47糖蛋白筛选出目标杂交瘤细胞
C．抗CD47单克隆抗体与巨噬细胞结合，增强其吞噬作用
D．在肿瘤细胞培养液中加入抗CD47抗体将抑制肿瘤细胞的增殖
20．6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如下图所示。有关叙述错误的是（ ）。
A．原代培养的细胞中都含有XF基因和XS基因
B．用胰蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
C．原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞
D．单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
21．近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（ ）
A．胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B．A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
C．D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
D．E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致
22．目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，染色体全部来自父系的“合子”致死。下列相关叙述错误的是（ ）
A．“半同卵双胞胎”的产生与透明带反应和卵细胞膜反应异常有关
B．排卵是卵子从卵泡中排出的过程，图中卵子发育到减数分裂Ⅱ的中期
C．细胞a的染色体组成为MP1,则细胞c的染色体组成为P1P1或MM
D．这对小姐弟来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的常染色体可能不同
23．我国科学家利用体细胞诱导产生多能干细胞（iPS细胞），并将其注射到无法发育到成体阶段的四倍体囊胚中，最终获得克隆鼠，经鉴定证实克隆鼠确实从iPS细胞发育而来，并可繁殖后代。实验流程见图，下列分析错误的是（ ）
A．小鼠iPS细胞在特定条件下可恢复受精卵时期的功能
B．四倍体囊胚可能因染色体数目变异而无法发育为成体
C．本实验使用到体外受精、胚胎移植和胚胎分割等技术
D．克隆鼠的肝脏移植给黑鼠可避免免疫排斥反应
24．下列有关精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述错误的是（ ）
A．受精过程开始的标志是精子进入次级卵母细胞
B．防止多精入卵的两道屏障是顶体反应和卵细胞质膜反应
C．精子的发生是依附在支持细胞上进行的
D．精子细胞质膜与卵子细胞质膜的融合依靠了细胞质膜的结构特点
25．澳大利亚布里斯班一对小姐弟被确认为全球第二对半同卵双胞胎，发育成该对半同卵双胞胎的受精卵形成过程如图所示，图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成A、B、C三个细胞，其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，正确的是（ ）
A．图1表示卵子的异常受精过程，此时卵子发育到减数第一次分裂的中期
B．该卵子与2个精子受精，表明顶体反应和透明带反应未能阻止多精入卵
C．若图4细胞A包含父系和母系染色体组各1个，则细胞C含2个母系染色体组
D．这对小姐弟来源于母亲的染色体一般相同，来源于父亲的染色体可能不同
26．某家系甲、乙两种单基因遗传病的系谱图如图1所示。控制两病的基因均不在Y染色体上，已死亡个体无法知道其性状。图2是对控制甲病的基因通过PCR技术后用某限制酶处理并电泳的结果图。外周血相对骨髓而言，指被造血器官释放到血管里参与血液循环的血。下列相关叙述错误的是（ ）
A．乙病是常染色体隐性遗传病的依据是Ⅱ₃、Ⅱ₄正常，生出了患乙病的Ⅲ₁₀
B．判定甲病是伴X显性遗传病，Ⅱ₇和Ⅱ₈再生育一位健康女孩的概率是1/6
C．从电泳的结果可知致病基因的限制酶的切割位点移往原基因长的片段
D．Ⅱ₆和一位家族无相关病史的女性结婚，抽取母体外周血进行基因检测可以判断胎儿是否患病
27．我国科学家研究发现，真核细胞的核基因表达调节机制——内含子miRNA通过下调转录因子来调控基因的表达，图甲和图乙是发生在细胞核内的正向和反向调节机制模式图。请据所学知识分析，下列叙述错误的是（ ）
A．内含子miRNA是在转录水平来调控基因的表达
B．内含子miRNA调控基因的表达存在反馈调节机制
C．形成主基因mRNA和成熟miRNA需解旋酶和限制酶的作用
D．该研究为某些疾病如肿瘤提供多个靶点联合治疗
28．图1为某单基因遗传病的遗传系谱图，Ⅲ1表型未知。取图1中四名成员的DNA，通过PCR扩增与该病基因相关的片段，并对产物酶切后进行电泳，结果如图2。不考虑基因位于X、Y染色体的同源区段，下列叙述错误的是（ ）
A．Ⅱ3的基因型与Ⅱ5的基因型相同的概率是1/3
B．与正常基因相比，突变基因可能发生了碱基的替换
C．该突变基因新增的酶切位点可能位于310bp的片段中
D．如果用PCR扩增Ⅲ1与此病基因相关的片段，酶切后电泳将产生三种条带
29．CRISPR/Cas9是一种生物学工具，能够通过“剪切和粘贴”脱氧核糖核酸（DNA）序列的机制来编辑基因组。CRISPR-Cas9基因组编辑系统由向导RNA（也叫sgRNA）和Cas9蛋白组成，向导RNA识别并结合靶基因DNA，Cas9蛋白切断双链DNA形成两个末端。这两个末端通过“断裂修复”重新连接时通常会有个别碱基对的插入或缺失，从而实现基因敲除，如图所示。CRISPR-Cas9基因组编辑技术有时存在编辑出错而造成脱靶。下列叙述正确的是（ ）
A．Cas9蛋白的功能与限制酶类似，能作用于脱氧核糖和碱基之间的化学键
B．设计sgRNA时只需要考虑识别区域的碱基序列不需要考虑sgRNA的长度
C．其他DNA序列含有与sgRNA互补配对的序列，造成sgRNA错误结合而脱靶
D．对不同目标DNA进行编辑时，使用Cas9蛋白和相同的sgRNA进行基因编辑
30．苯丙酮尿症是由pH基因编码的苯丙氨酸羟化酶异常引起的一种遗传病。已知人群中染色体上pH基因两侧限制性内切酶MspⅠ酶切位点的分布存在两种形式（图1）。一对夫妻婚后生育了一个患有苯丙酮尿症的孩子，②号个体再次怀孕（图2）。为确定胎儿是否正常，需要进行产前诊断，提取该家庭所有成员的DNA经Msp I酶切后进行电泳分离，并利用荧光标记的pH基因片段与酶切片段杂交，得到DNA条带分布情况如图3.下列叙述正确的是（ ）
A．①号个体23Kb的DNA条带中一定含有正常pH基因
B．②号个体23Kb的DNA条带中一定含有正常pH基因
C．推测④号个体不一定是苯丙酮尿症患者
D．④号个体为PAH基因杂合体的概率为2/3
31．Cre-lxP系统能实现特定基因的敲除（如图1）。把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列（lxP1和lxP2）串在一起，构建表达载体T（如图2）。部分荧光蛋白基因会被Cre酶随机“剪掉”，且两个lxP1之间或两个lxP2之间的基因，最多会被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表达，随机呈现不同的颜色。下列说法错误的是（ ）
A．Cre酶切下一个待敲除基因的过程，需要破坏四个磷酸二酯键
B．若小鼠细胞含一个表达载体T（不含Cre酶），其肌肉组织细胞呈红色
C．若小鼠细胞含一个表达载体T（含Cre酶），其脑组织细胞呈红色或黄色或蓝色
D．若小鼠细胞含两个表达载体T（含Cre酶），其一个细胞内可能随机出现两种颜色
32．脊髓性肌萎缩症（SMA）是一种单基因遗传病，主要由运动神经元存活基因 1（SMN1）突变引起，SMA 在胎儿发育期常常不表现出结构畸形，出生后表现为肌无力和肌萎缩，具有严重的致死性。现有一对正常夫妻，生出一个 SMA 男孩（染色体组成为 XXY）后他们进行了基因检测，电泳结果如图（正常基因一条带，致病基因为另一不同的条带，不考虑 XY同源区段）。下列叙述正确的是（ ）
A．患病男孩同时患有常染色体隐性遗传病和染色体异常遗传病
B．SMA的致病原因是SMN1 基因碱基的缺失引起的基因突变
C．患病男孩的染色体异常是由于母亲或父亲减数分裂Ⅰ性染色体未分离导致的
D．SMA 遗传病可以通过 B超检查等产前诊断进行治疗
33．PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），利用大肠杆菌表达该蛋白。下图为所用载体示意图，phb2基因基因序列不含图中限制酶的识别序列。下列叙述错误的是（ ）
A．将phb2基因与载体正确连接构建基因表达载体是培育转基因大肠杆菌的核心工作
B．为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端可分别引入PvuⅡ和EcRI限制酶的识别序列
C．在使phb2基因与载体连接时，在扩增的phb2基因两端都引入PvuⅡ限制酶的识别序列可能导致目的基因环化
D．构建基因表达载体时，需选择BamHI限制酶破坏氨苄青霉素抗性基因，以便对目的基因是否正常转人进行检测与鉴定
34．接种流感疫苗是目前普遍采用的预防流感的措施。流感病毒极易突变，流感疫苗需要根据流行毒株不断更新。为研发广谱且高效的流感疫苗，科研人员尝试将不同流感毒株共有的某种抗原蛋白片段展示在T4噬菌体衣壳表面。下列叙述错误的是（ ）
A．可用灭活或减毒的流感病毒制成流感疫苗，诱导机体产生相应抗体
B．抗原呈递细胞能摄取和加工处理病毒抗原，并呈递给辅助性T细胞
C．广谱型流感疫苗是利用流感病毒容易改变的抗原蛋白诱发免疫反应
D．若使T4噬菌体表面携带抗原蛋白，需将目的基因整合到其基因组中
35．黏粒是质粒的衍生物，cs序列是λ噬菌体将DNA包装到噬菌体颗粒中所需的序列。如图是黏粒作用原理的示意图，其中ri是复制原点，AmpR是氨苄青霉素抗性基因。下列相关叙述正确的是（ ）
A．线状重组黏粒进入受体菌后不会发生自身环化
B．ri和AmpR序列均便于筛选出含目的基因的受体菌
C．步骤①和②应使用同一种酶，以确保目的基因与黏粒正确连接
D．含目的基因的重组黏粒与λ噬菌体包装蛋白混合后用于构建λ噬菌体
36．甜菜碱是一种渗透调节物质，可提高植物耐旱能力。科研人员将球形节杆菌中的cdA基因（合成某种酶催化胆碱生成甜菜碱）导入杨树细胞内，以提高其抗旱能力。已知胆碱在合成甜菜碱的过程中有副产物H2O2（具有较强氧化性）产生。下列相关叙述错误的是（ ）
CNT：正常供水的野生型；CT：正常供水的转基因杨树；DNT：干旱胁迫下的野生型；DT：干旱胁迫下的转基因杨树。
A．为保证实验准确性，正常供水组和干旱胁迫组需要每天检测栽培土壤的含水量并维持其恒定在两个不同水平
B．甲图显示，野生型杨树在干旱周时叶片中甜菜碱含量明显上升，这说明其细胞内也含一定数量的cdA基因
C．据甲、乙两图分析可知，干旱3周时转基因杨树叶片内H2O2的分解速度快于野生型杨树
D．在干旱胁迫5周复水1周后，两种杨树叶片内甜菜碱和H2O2含量均下降，说明叶片细胞可能被过量H2O2氧化开始死亡
37．人类是乙肝病毒的唯一宿主，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。下图为乙肝病毒基因工程疫苗的生产和使用流程，质粒中LacZ基因可使细菌能够利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则呈白色。下列有关叙述正确的是（ ）
A．过程①最好的限制酶选择方案是BamHI和EcRV
B．质粒用限制酶BamHI和EcRV切割后产生4个游离的磷酸基团
C．过程②需要在培养基中加青霉素和X-gal以筛选蓝色的大肠杆菌菌落
D．基因工程疫苗不会出现病毒的增殖和感染，安全性高
38．在胰岛B细胞中，当胰岛素原向胰岛素转变的过程中，furin酶可以识别并切除胰岛素原分子中特定的氨基酸序列，从而完成胰岛素的加工，产生具有生物活性的胰岛素。某些糖尿病患者体内合成的胰岛素原结构异常，不能正常完成上述过程。基因治疗该类患者的方法之一是：将胰岛素基因导入胰岛B细胞以外的细胞，同时导入一些调节因子刺激该细胞再生，使之成为能分泌具生物活性胰岛素的新B细胞。欲使胰岛素基因的表达产物在新的B细胞中能被加工，产生生物活性，正确的操作是
A．导入胰岛素基因时，同时导入furin酶基因
B．导入胰岛素基因后，加入furin酶
C．使胰岛素基因的表达产物中含furin酶切位点
D．改造furin酶基因，使其丧失识别和切除功能
39．水稻是我国最重要的粮食作物。稻瘟病是由稻瘟病菌（Mp）侵染水稻引起的病害，严重危害我国粮食生产安全。与使用农药相比，抗稻瘟病基因的利用是控制稻瘟病更加有效、安全和经济的措施。 现有甲（R1R1r2r2r3r3）、乙（r1r1R2R2r3r3）、丙（r1r1r2r2R3R3）三个水稻抗病品种，抗病（R）对感病（r）为显性，三对抗病基因位于不同染色体上。根据基因的 DNA 序列设计特异性引物，用 PCR 方法可将样本中的 R1、r1、R2、r2、R3、r3 区分开。这种方法可用于抗病品种选育中基因型的鉴定。并且研究发现， 水稻的抗病表现不仅需要自身抗病基因（R1、R2、R3等）编码的蛋白，也需要 Mp 基因（A1、A2、A3等）编码的蛋白。只有 R 蛋白与相应的 A 蛋白结合，抗病反应才能被激活。
用甲品种与感病品种杂交后，对F2不同植株的 R1、r1进行 PCR 扩增。已知 R1比r1 片段短。如下为扩增结果。请分析选项中正确的是：
A．水稻种植区的 Mp 是由不同基因型组成的群体。大面积连续种植某个含不同抗病基因的水稻品种，将会引起 Mp 种群基因频率改变，使该品种抗病性逐渐减弱直至丧失，无法在生产中继续使用
B．为了在较短时间内将甲、乙、丙三个品种中的抗病基因整合，选育新的纯合抗病植株， 育种步骤的正确排序是先将甲×乙，得到F1R1r1R2r2r3r3植株×丙，得到不同基因型的子代，再用 PCR 方法选出 R1R1R2R2R3R3植株
C．若基因型为 R1R1r2r2R3R3和 r1r1R2R2R3R3的水稻，被基因型为 a1a1A2A2a3a3的 Mp侵染，推测这两种水稻的抗病性表现依次为抗病、感病
D．研究人员每年用 Mp（A1A1a2a2a3a3）人工接种水稻品种甲（R1R1r2r2r3r3），几年后甲品种丧失了抗病性，检测水稻的基因未发现变异。推测甲品种抗病性丧失的原因是 Mp 的A1基因发生了突变。
40．利用山金柑愈伤组织细胞（2n）和早花柠檬叶肉细胞（2n）进行体细胞杂交可以得到高品质、抗逆性强的杂种植株。下图是7组杂种植株核DNA和线粒体DNA来源鉴定的结果。下列分析正确的是（ ）
A．山金柑愈伤组织细胞没有细胞壁，早花柠檬叶肉细胞用酶解法去除细胞壁后才能与前者融合
B．用灭活的病毒诱导两种细胞原生质体的融合，依赖于细胞膜的流动性
C．可通过观察融合后细胞的颜色进行初步筛选
D．杂种植株是四倍体，其核基因只来自早花柠檬，线粒体基因只来自山金柑
41．新型冠状病毒是一种 RNA 病毒，极易发生变异，其通过表面棘突蛋白（S 蛋白） 的受体结合域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体相互作用而感染人体细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1，可与S蛋白RBD紧密结合，以干扰新型冠状病毒的感染。下列有关说法，错误的是（ ）
A．LCB1的作用效应与抗S蛋白抗体类似
B．可用蛋白质工程进行LCB1的生产
C．新型冠状病毒侵入人体后可在内环境中大量增殖
D．易感人群即使注射疫苗也仍然具有被感染的可能
42．玉米中赖氨酸含量比较低的原因是赖氨酸合成过程中的两种关键酶——天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性，受细胞内氨基酸浓度的影响较大。赖氨酸达到一定浓度时会抑制这两种酶的活性。为了提高玉米中的赖氨酸含量，兴趣小组提出的下列方法不可行的是（ ）
A．用紫外线处理玉米愈伤组织，筛选有利突变体
B．将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞
C．通过基因定点突变技术修饰天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶基因的个别碱基
D．利用蛋白质工程直接改造天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的空间结构
43．抗体酶又称催化抗体，是一类免疫球蛋白，其结构如下图所示，它既具有相应的免疫活性，又能像酶那样催化某种化学反应。下列有关叙述错误的是（ ）
A．抗体酶与抗原、底物的结合均具有专一性的特点
B．抗体酶可使药物的前体物质在肿瘤组织中水解为活性分子，从而起杀伤作用
C．抗体酶能阻止病毒与靶细胞结合的机理可能是选择性地使病毒外壳蛋白发生水解
D．可通过蛋白质工程对特异抗体的抗原结合位点进行空间改造，使其获得催化功能
44．基因定点突变的目的是通过定向地改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。该技术是蛋白质工程的重要技术。下图为利用PCR技术进行定点突变的流程，相关叙述错误的是（ ）
A．由于基因决定蛋白质，因此要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成
B．酶① 应为耐高温DNA聚合酶，引物X和Y应该为引物2和4
C．可以将引物1、引物2、引物3和引物4置于同一个反应系统中同时进行第一个阶段的反应，进而缩短实验时间
D．利用图示流程技术可以将两个不同的基因拼接到一起
45．基因定点突变的目的是通过定向地改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。该技术是蛋白质工程的重要技术。下图为利用PCR技术进行定点突变的流程，相关叙述错误的是（ ）
A．由于基因决定蛋白质，因此要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成
B．酶A应为耐高温DNA聚合酶，从4中引物中应该选择引物1和4进行PCR
C．可以将引物1、引物2、引物3和引物4置于同一个反应系统中同时进行第一个阶段的反应，进而缩短实验时间
D．利用图示流程技术可以将两个不同的基因拼接到一起
二、多选题
46．双层平板法是一种利用底层和上层均为牛肉膏蛋白胨培养基对噬菌体进行检测的常用方法。具体操作如下：先在无菌培养皿中倒入琼脂含量是2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量是1%的培养基融化并冷却至45～48℃，然后加入宿主细菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板。培养一段时间后，在上层平板上看见由于噬菌体侵染周围细菌而使宿主细胞裂解死亡形成的空斑即噬菌斑。通常一个噬菌斑来自原液中的一个噬菌体。根据噬菌斑的数目计算原液中噬菌体的数量，如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．牛肉膏蛋白胨培养基可作为选择培养基选择出噬菌体的宿主细胞
B．加入混合液后，使用灭菌后的涂布器将混合液均匀地涂布在培养基表面
C．上层培养基中琼脂浓度较低，因此形成的噬菌斑较大，更有利于计数
D．双层平板法获得的噬菌斑不易发生上下重叠现象
47．研究发现，鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株在基本培养基平板上不能生长，如果发生回复突变成原养型（其营养要求在表现型上与野生型相同）后则能生长。诱变剂A只有进入机体并在肝脏的解毒过程中才能形成有害的诱变物质。可以使用细菌营养缺陷型是否发生回复突变来检测食品样品中是否存在诱变剂A。将疑似含有诱变剂A的食品样品中加入新鲜鼠肝脏匀浆液，经一段时间保温后吸入小圆形滤纸片中，然后将圆形滤纸片贴在已接种了组氨酸营养缺陷型菌株且含有少量组氨酸的基本培养基上。经培养后，观察滤纸片周围菌落的生长情况。下列有关说法正确的是（ ）
A．若含有少量组氨酸的基本培养基上没有产生大量菌落，则说明食品样品中可能不含诱变剂A，不含有组氨酸的基本培养基上接种组氨酸营养缺陷型菌株出现少量菌落可能是自发突变的结果
B．食品样品加入新鲜鼠肝脏匀浆液保温一段时间的目的是诱发肝脏突变产生能够合成组氨酸的相关酶
C．若滤纸片周围出现了抑制圈，抑制圈外产生大量菌落，推测食品样品中可能含有高浓度诱变剂A
D．组氨酸营养缺陷型菌株突变为原养型是在食品样品中诱变剂A的作用下等位基因发生回复突变的结果
48．三糖铁（TSI）培养基含有牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、乳糖、微量葡萄糖、硫酸亚铁、氯化钠、酚红、琼脂等成分，可根据观察单一细菌对三种糖的分解能力及是否产生硫化氢，来鉴别细菌的种类。三糖铁（TSI）琼脂试验方法是：使用笔直的接种针挑取待测菌落，将接种针平稳刺入三糖铁固体斜面培养基内，然后沿原穿刺途径慢慢抽出接种针，最后在斜面上进行“之”字划线，36℃下培养18～24h，观察实验结果。酚红在酸性条件下显黄色，在碱性条件下显红色。细菌产生的硫化氢与铁盐反应生成黑色沉淀。下列叙述正确的是（ ）
A．穿刺或划线的目的是为了将纯培养物进行二次传代培养，须严格控制交叉污染
B．若培养基出现黑色沉淀，可推测该细菌能够分解牛肉膏、蛋白胨
C．若细菌能分解乳糖和葡萄糖而产酸、产CO2，推测斜面为黄色、底层为红色且有气泡
D．若底层穿刺线四周出现扩散生长现象，可推测细菌是可以运动的
49．人类病原微生物在人与实验动物上症状表现和代谢差异大，导致实验结果无法准确应用于人体。人源化肝脏嵌合鼠的成功构建提供了一种新的实验动物模型，下图为建立人源化肝脏嵌合鼠的主要流程，相关叙述正确的有（ ）
A．选择免疫缺陷的小鼠可以防止其对肝毒性基因的免疫排斥
B．可将iPS细胞在一定条件下定向分化成有功能的肝细胞，用于移植
C．人源化肝脏嵌合鼠是含有人、鼠各两个染色体组的四倍体
D．人源化肝脏嵌合鼠适用于人类病毒性肝炎的研究
50．现已建立一种简便快捷、适用于诺如病毒常见流行株的胶体金免疫层析检测方法。即用常见流行株GII.4型诺如病毒的衣壳蛋白P颗粒作为抗原利用小鼠制备单克隆抗体1B10（浓度为5 mg/mL）和1D6（浓度2.2 mg/mL）。利用羊制备羊抗鼠抗体作为质控线组装成胶体金试纸条（见图）。下列说法正确的是（ ）。
A．单克隆抗体1B10和单克隆抗体1D6特异性识别同一种抗原决定簇
B．胶体金试纸条上使用的三种抗体由同一种杂交瘤细胞合成并分泌
C．检测时，在控制线和检测线出现两条色带时，表示结果阳性
D．胶体金试纸条可以用来检测所有类型诺如病毒感染导致的胃肠炎
51．生物科技已有广泛的应用，下列相关叙述正确的是（ ）
A．基因工程可实现同一基因在不同生物体内表达，这表明生物界在遗传物质种类及遗传密码方面具有统一性
B．单克隆抗体的制备过程中需要进行严格的细胞筛选，这表明产生抗体的细胞毒性T细胞具有多样性和特异性
C．胚胎移植时需要选择合适发育时期的胚胎，这与胚胎发育中细胞分化程度及胚胎是否处于游离状态有重要关系
D．生态修复工程可帮助受损生态系统更快恢复原有结构与功能，移栽绿植需要适应当地环境且无生物入侵危害
52．基因组印记（通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达）阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶以及基因编辑技术增加了两个父系基因组印记控制区域的甲基化，以及母系控制区域的5个去甲基化，经修饰的卵母细胞经早期胚胎培养后进行胚胎移植，成功培育出可育的孤雌小鼠，部分过程如下图所示。相关叙述错误的是（ ）
A．基因组印记导致一对等位基因中的一个发生突变而不能表达
B．卵母细胞的体外培养除需加入血清等营养，还需加入干扰素
C．生育出的孤雌小鼠为只含有母系基因的单倍体小鼠
D．与野生型小鼠相比孤雌小鼠的遗传多样性降低，野外生存能力下降
53．琼脂糖凝胶电泳中染色方式根据电泳与染色的前后关系分为前染色与后染色，前染色是将染色剂预混在琼脂糖凝胶中，DNA 在移动过程中结合染色剂形成染色剂-DNA复合体，电泳过程中可以随时观察 DNA 移动情况；后染色是电泳结束后再单独染色，染色剂用量较太。将某 DNA样品均分为三份，进行琼脂糖凝胶电泳，结果如下图所示。下列有关说法正确的是（ ）
A．DNA 的迁移速率与自身分子大小和构象、凝胶浓度以及是否结合染色剂等因素有关
B．向熔化稍冷却的琼脂糖溶液中加入核酸染料后制成凝胶属于后染色
C．后染色较前染色 DNA 迁移速度快
D．对于大于3000bp的DNA片段，EB染色的分辨效果好于 GelRed染色
54．交错PCR能实现同源基因的重组（如图，仅示单链）。第一轮延伸15s，获得短产物①②。在第二轮开始时（95℃）产物①②与原来模板分开，然后（55℃）随机地与不同模板交错结合，延伸15s，合成交错产物③④。每一轮扩增仅延伸一小段，经过多轮“产物-模板”交替结合、延伸，最终扩增出交错重组基因产物。相关叙述正确的是（ ）
A．交错PCR原理是DNA半保留复制
B．交错PCR延伸温度设定为55℃可增加交错次数
C．上一轮交错产物需与模板链严格配对才能继续下一轮扩增
D．若交错循环20轮，一共产生220个DNA分子
55．Sanger测序法是第一代基因测序方法，测序原理如图所示，其中ddATP、ddCTP、ddGTP、ddTTP(统称为ddNTP)为双脱氧核苷酸，其2、3号碳原子上没有氧原子。下列相关说法正确的是（ ）
A．被测模板的序列应该为5'—CTAAGCTCGACT—3'
B．ddNTP可以连接到延伸的子链中，但此后子链将无法延伸
C．合成的子链中最长的类型会出现在第一组实验中
D．电泳结果共出现了12条长短不同的条带，但被测模板实际碱基数要超过12个
三、非选择题
56．发酵工程是指采用工程技术手段，利用生物（主要是微生物）和有活性的离体酶的某些功能，为人类生产有用的生物产品，或直接用微生物参与控制某些工业生产过程的一种技术。与传统发酵相比，发酵工程所用发酵菌往往是优良菌种，分离、筛选、纯化优良菌种是发酵工程的重要环节。请回答下列问题。
(1)分离、筛选、纯化优良菌种时，需要先配制固体培养基或液体培养基，这两种培养基在成分上的差异一定有 。
(2)进行图1所示操作时，应在酒精灯火焰旁进行，原因是 。培养阶段，进行图2所示操作的主要目的是 。培养阶段，会预留一部分不接种的平板，目的是 。
(3)工业化生产酸奶，需用到优良的乳酸菌。从分离出的乳酸菌中筛选出优良的乳酸菌，可将乳酸菌样液经 后，再涂布到含CaCO3的特定培养基上（不透明），在适宜条件下培养一段时间后，挑选 的单菌落可视为由优良乳酸菌形成的。
(4)某兴趣小组利用抽样检测法统计酵母菌样液中活菌的数量时，先向样液中滴加适量台盼蓝染液（台盼蓝染液对样液体积的影响忽略不计），这样处理的原理及目的是 。
57．三峡水库运行后，沿岸的生态系统平衡遭到了巨大挑战。水位周期性涨落形成了消落带，水土流失导致植被难以生长。有学者提出桑树抗干旱、耐水淹，有望作为消落带生态系统恢复候选植被。同时，利用微生物菌肥，可促进桑树在消落带中生长。为分离、筛选产吲哚乙酸的桑树根际细菌，并检测对不同环境耐受性，研究人员进行了以下操作。
步骤一：样品的采集与保存：将紧贴桑树根表的土壤作为桑树根际土壤，收集至无菌封口袋中编号，4℃保存备用。
步骤二：桑树根际细菌的分离：利用梯度稀释涂布平板法分离细菌，如图。
步骤三：桑树根际细菌的纯化：将上述平板置于28℃培养箱中培养，逐日观察。待平板上长出新菌落后进行纯化培养。
步骤四：筛选产吲哚乙酸（IAA）的根际细菌。结果如下图（IAA溶液与Salkawski发生显色反应，呈粉红色）。
步骤五：检测菌株对不同环境耐受性。
请回答下列问题。
(1)步骤一中从根表土壤取样，不从深层土壤取样，其原因是 。
(2)步骤二图中的液体量分别是 、 ，涂布时所采用的工具是 。
(3)步骤三中需将平板倒置培养的原因是 。
(4)步骤四中A、B的处理分别表示 、 ，初步判断 （HGS7/HWS1菌株）产IAA的能力更强。
(5)步骤五的结果如下图（OD值表示菌体浓度）。
HGS7、HWS1两种菌株中对环境适应性较强的是 ，理由是 。
(6)施用筛选出的根际细菌能促进桑树生长的原因有 ；与施用化学肥料相比，施用微生物菌肥的优点是 。
58．近年来，高氨氮废水的处理不当以及持续排放，导致了水体污染的日益严重。生物脱氮法相对于物化法来说，工艺简单、处理成本低、无二次污染，是较好的氨氮废水处理方法。某科研团队从湖底污泥中分离、筛选出能降解氨氮的菌株，并研究其降解氨氮的最适条件，包括培养温度、培养时间、起始的pH等，实验步骤如下。回答下列问题：
（1）步骤一：将1g水底污泥加入9 mL无菌水中制成悬液，接种至100mL液体培养基中，于30℃的温度条件下在摇床中培养7天。期间，每天向培养基中加入1mL浓度为5％的（NH4）2SO4溶液，这项操作的目的是 。
（2）步骤二：将培养后的菌液用 法涂布到分离培养基中，倒置于30℃的恒温培养箱中，培养至长出菌落。若平板中菌落过于密集，应进一步 。反复分离纯化，至同一平板中只出现同种形态的菌落。
（3）步骤三：将筛选分离后的各菌株分别接种到氨氮含量为120 mg·L﹣1的液体筛选培养基（模拟高浓度氨氮水样）中，在30℃的温度条件下摇瓶培养24小时后，取培养液进行离心10分钟，取其上清液， ，从而计算出各个降解菌的氨氮降解率。
（4）步骤四：将筛选出的最优菌种于30℃的温度条件下在摇床中培养24小时。每隔2小时对培养基进行测定，研究降解氨氮的最佳培养时间。下图是某菌株的氨氮降解率曲线图，据图可以得到的结论有 （写出两点）。
（5）步骤五：若要探究所分离纯化出的菌株对氨氮降解的最适培养温度，实验思路是： 。
59．人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程：
(1)人参与西洋参杂交存在花期不遇、F1代结实率低及难获得F2代的现象，说明两者之间存在 ，是两个不同的物种。人参和西洋参含有人参皂苷，可以作为药物，体现了生物多样性的 价值。
(2)过程①称为 。过程④优化悬浮细胞培养体系，最重要的条件是蔗糖浓度的筛选，蔗糖浓度过低和过高均不利于悬浮细胞的培养，原因是 。
(3)科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见下图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。杂种胚中的大多数种类的皂苷的含量均高于其他两种，这体现了 。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择 的愈伤组织。
(4)科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的抑制效果：
①首先培养胃癌细胞，培养液中加入胎牛血清的目的是 。培养条件为5%CO2，作用是 、饱和湿度，温度为37℃。将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种于小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。
②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。请根据图3写出计算肿瘤体积变化的公式： 。根据实验结果可以得出的结论有 。
60．我国是个农业大国，加快建设农业强国，强化生物育种，捍卫种子安全是我国当前农业生产和发展的重要问题。生物的变异理论常用于指导农业生产，植物突变育种是指人为利用物理、化学因素，使植物发生遗传变异，从而获得优良品种或品系的一种育种方法。回答下列问题：
(1)玉米（2n=20）是我国主要粮食作物之一，常用单倍体育种技术选育玉米新品种。单倍体玉米植株的一个染色体组含有 条染色体，其在减数分裂中染色体不能正常联会，导致 引起高度不育。
(2)油菜是白菜（染色体组为 AA，n=10）与甘蓝（染色体组为CC，n=9）通过种间杂交产生的异源四倍体。科研人员以萝卜（染色体组为 RR，n=9）和油菜为亲本杂交，通过如图所示途径获得油菜新品种。
①般情况下，种间植物的基因不能自由交流，原因是种间植物存在 。 油菜与萝卜杂交获得F₁,F₁ （填“可育”或“不可育”）。
②杂合植物 BC1的染色体组成是 。）BC2植株的染色体数目可能在 条之间，原因是 。
(3)科研人员用 X射线处理女娄菜（XY 型）种子，种植后得到了一株金黄色的突变雄株。研究发现，突变株是染色体上的1个基因突变引起的。为进一步了解突变基因的显隐性关系，以及突变基因在染色体的位置，请设计实验方案，写出实验思路： 。
61．癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出的地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。
(1)癌细胞由于 突变导致其表面物质发生改变，如某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗，据图1推测，其原因是 。但此种方法对一些肿瘤无效。
(2)CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，诱导T细胞定向杀伤癌细胞，如下图2。
制备过程为：先将 分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的 细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于 而产生多种抗体，因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。
(3)科研人员将癌细胞和T细胞共同培养，加入不同抗体，比较不同抗体对T细胞活化的作用。实验各组由活化T细胞产生的细胞因子IL-2含量如下图3，结果说明 。
(4)共同培养癌细胞和T细胞，经处理形成图4所示的细胞结合部位，再均分为两组，A组中加入非阻断性PD-1单抗（与PD-1结合后，PD-1仍可和PD-L1结合），B组加入正常PD-1单抗，两组均加入蓝色荧光标记的CD28单抗，观察荧光分布，结果如下图4。请据此实验解释（3）中双特异性抗体PSMA×CD28与PD-1单抗联合使用对T细胞激活的影响 。
62．调查显示，病毒性传染病严重危害山羊健康，且多种病原体混合感染的情况较普遍。干扰素是对抗病毒感染中发挥重要作用的蛋白质，因此通过疫苗接种控制传染病暴发流行的同时，积极研究广谱、高效、安全的干扰素对山羊病毒性传染病的防治有着十分现实的意义，其基本流程如下。
(1)获取干扰素基因：从下列①~⑧项中选择合适选项填入空格处，使方案可行。
①肝细胞的总RNA；②单核细胞的所有DNA；③引物；④RNA酶抑制剂；
⑤逆转录酶；⑥dNTP；⑦TaqDNA聚合酶；⑧DNA连接酶
设计方案：获取 作为模板，同时还需要的实验材料或试剂有 。
(2)构建重组表达载体：将获得的含目的基因的DNA片段（不含限制酶的识别序列）进行PCR，利用的引物序列如下：
引物1：5'-CATGCCATGGCAGGCTGCCACCTGCCTCACATCCA-3'；
引物2：5'-CGGTACCTTCAGTCCTTCCTCTGGATCT-3'。
经大量扩增后，用限制酶NcI（5'-C↓CATGG-3'）对获得的含目的基因的DNA片段进行酶切，目的基因的DNA片段上有 个黏性末端，理由是 。作为表达载体的质粒上，除了标记基因和多个限制酶的识别序列外，还需要有 （写2种即可）。质粒与目的基因用合适的限制酶处理后进行拼接。
(3)大肠杆菌的转化和表达：将大肠杆菌放于低温、低浓度的 溶液中，成为感受态细胞，再将大肠杆菌与重组DNA分子混合，最后进行短暂的 处理，使外源DNA转入大肠杆菌，然后将重组菌在适宜条件下，诱导其表达干扰素，最后进行产物分离保存。
(4)干扰素的抗病毒活性检测：先将一种山羊的肾细胞接种于多孔板，培养至单层贴壁细胞，再将其随机均分为6组（A~F），其中C~F组加入不同浓度的干扰素，A~F组置于适宜条件下培养24小时后， 组加入病毒，其中以 组为阳性对照，每隔12小时观察细胞病变情况。结果是A组细胞大小形态正常，贴壁良好，B组细胞逐渐出现坏死脱落，C~F组的细胞不同程度的少量坏死脱落，而且 ，由此可见，干扰素能以浓度依赖的方式显著抑制病毒诱导的细胞病变。
63．磷脂酸（PA）是调节植物生长发育和逆境响应的重要信使物质。为了解植物细胞中PA的动态变化，研究人员用无缝克隆技术将高度专一的PA结合蛋白（PABD）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因融合，构建有效监测细胞PA变化的荧光探针，并测定拟南芥细胞内PA含量。无缝克隆技术连接DNA片段的机理和构建荧光探针表达载体过程如图所示，请回答下列问题。
(1)无缝克隆时，T5核酸外切酶沿 的方向水解DNA，其目的是形成 。T5核酸外切酶催化的最适温度为37℃，而过程①选择的温度为50℃，目的是降低酶活性， 。
(2)过程②两个片段退火后存在“缺口”的原因是 ，过程③所需的酶有 。
(3)与传统的酶切再连法相比无缝克隆技术构建重组质粒的优点有___。
A．不受限制酶切位点的限制B．不会引入多余碱基
C．操作时间短，成功率高D．有利于多个小片段
(4)PCR扩增PABD基因时需依据 设计引物R1。据图分析扩增目的片段的引物F1和R2对应于下表中的 。
(5)利用农杆菌花序侵染法转化拟南芥，将获得的种子（T1）进行表面消毒，均匀铺在含有 的MS培养基上进行筛选和鉴定。T1代自交获得的T2代幼苗的抗性表现和比例为 ，说明T1为单位点插入的转基因株系。
(6)通过观测转基因拟南芥根尖细胞中 ，了解PA的动态变化。
64．近期，人类第一款基于CRISPR技术的Casgevy疗法获准用于治疗镰状细胞贫血等疾病。相关信息如下图1和图2所示。请回答下列问题：
(1)镰状细胞贫血是一种 遗传病，患者β珠蛋白分子中缬氨酸代替了谷氨酸，致使去氧血红蛋白溶解度降低并聚集形成纤维结构，压迫细胞膜致红细胞弯曲成镰刀状。由此说明 控制生物体的性状。
(2)γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，BCL11A蛋白是一种转录因子，可抑制胎儿血红蛋白的合成。出生后，随着个体的发育进行，BCL11A蛋白的 ，γ基因的表达逐渐被 。镰状细胞贫血患者一般在出生一年后出现症状，而婴儿通常无症状，请尝试解释原因： 。
(3)据图2判断，Cas9是一种 酶，能催化 键水解，但需要依赖 识别基因组DNA上的靶点序列，才能使DNA分子在特定序列附近被切断。
(4)Casgevy疗法大致过程：从患者体内提取合适的造血干细胞，通过电穿孔导入特异性靶向BCL11A增强子的CRISPRCas9基因编辑系统，获得 细胞，恢复胎儿血红蛋白的合成。与骨髓移植相比，Casgevy疗法的突出优点是 。
65．种子大小是作物重要的产量性状。研究者对野生型拟南芥（2n=10）进行诱变筛选到一株种子增大的突变体。通过遗传分析和测序，发现野生型DAI基因发生一个碱基G到A的替换，突变后的基因为隐性基因，据此推测突变体的表型与其有关，开展相关实验。
回答下列问题：
(1)拟采用农杆菌转化法将野生型DAI基因转入突变体植株，若突变体表型确由该突变造成，则转基因植株的种子大小应与 植株的种子大小相近。
(2)用PCR反应扩增DAI基因，用限制性核酸内切酶对PCR产物和 进行切割，用DNA连接酶将两者连接。为确保插入的DAI基因可以正常表达，其上下游序列需具备 。
(3)转化后，T-DNA（其内部基因在减数分裂时不发生交换）可在基因组单一位点插入也可以同时插入多个位点。在插入片段均遵循基因分离及自由组合定律的前提下，选出单一位点插入的植株，并进一步获得目的基因稳定遗传的植株（如图），用于后续验证突变基因与表型的关系。
①农杆菌转化T0代植株并自交，将T1代种子播种在选择培养基上，能够萌发并生长的阳性个体即表示其基因组中插入了 。
②T1代阳性植株自交所得的T2代种子按单株收种并播种于选择培养基，选择阳性率约 %的培养基中幼苗继续培养。
③将②中选出的T2代阳性植株 （填“自交”、“与野生型杂交”或“与突变体杂交”）所得的T3代种子按单株收种并播种于选择培养基，阳性率达到 %的培养基中的幼苗即为目标转基因植株。为便于在后续研究中检测该突变，研究者利用PCR扩增野生型和突变型基因片段，再使用限制性核酸内切酶X切割产物，通过核酸电泳即可进行突变检测，相关信息见下，在电泳图中将酶切结果对应位置的条带涂黑 。
组别
培养基成分
a
蛋白胨、酵母提取物、甘露醇、水
b
葡萄糖、尿素、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖
c
矿质元素、蔗糖、维生素、甘氨酸、水、琼脂
A：?
B：?
C：HGS7菌株发酵液+Salkawski
D：HWS1菌株发酵液+Salkawski
1
5'-TCCGGACTCAGATCTCGAGC-3'
2
5'-AGCTATAGTTCTAGATCTAGATTAACTAGTCTTAGTGGCGTC-3'
3
5'-TATCGATGGCGCCAGCTGAGGATGGTGAGCAAGGGCGA-3'
4
5'-GCTCGAGATCTGAGTCCGGACTTGTACAGCTCGTCCA-3'